人胚肾细胞293T

有效期至长期有效	最后更新2023-03-27 10:33
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HEK-293T细胞是293T（293tsA1609neo）细胞系（ATCC CRL-11268）的衍生物。细胞持续表达SV40抗原，该细胞常用于转染实验，转染效率较高。（转染一般以50%密度铺板，待细胞刚刚贴到皿壁上后（一般8-10小时），即可进行转染操作）

细胞特性

1）来源：人胚胎肾脏

2）形态：上皮细胞样，贴壁生长，贴壁能力较弱

3）含量：>1x106细胞数

4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用

l培养条件：

1）准备DMEM（推荐awcell-0001）培养基；**胎牛血清，10%；L-谷氨酰胺（2mM）1%；NEAA 1%；双抗1%

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

l注意事项：

人胚肾细胞293T该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞，传代可以参考以下方法：

1.收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。

2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10�S的培养基来终止消化。

3.将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的*培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

人胚肾细胞293T细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

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