人组织细胞淋巴瘤细胞U-937的数量

　　贴壁生长的细胞:

　　1、贴壁生长的细胞用T25细胞培养瓶发货,收到细胞后,拆开包装T25瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。

　　2、消毒后用显微镜观察细胞状态,并拍下细胞照片。

　　3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。

　　4、平衡后将T25瓶中培养基吸出用离心管装好备用。

　　5、如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6mL培养基放回培养箱继续培养即可。

　　悬浮生长的细胞:

　　1、悬浮细胞发货复苏后用离心管发货,拆开包装离心管的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。

　　2、然后用显微镜观察细胞状态。

　　3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上。

　　4、平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清。

　　5、用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。

　　用于单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）体外趋化人组织细胞淋巴瘤细胞（U937）的实验研究

　　1.模拟肿瘤微环境,检测单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在体外对人组织细胞淋巴瘤细胞（U937）的趋化作用；2.为研究单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在胶质瘤微环境中趋化肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）中的作用提供实验依据。

　　[方法]1.人组织细胞淋巴瘤细胞（U937）复苏、原代培养及传代培养；

　　2.单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）加入[ranswell小室下室,人组织细胞淋巴瘤细胞（U937）接种到Transwell小室上室,进行体外趋化实验；

　　3.碳酸聚酯膜冲洗、固定、HE染色,镜下阅片观察趋化人组织细胞淋巴瘤细胞（U937）数量；

　　4.血球计数板计数趋化细胞离心浓缩液中人组织细胞淋巴瘤细胞（U937）数量,检测单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）趋化人组织细胞淋巴瘤细胞（U937）的能力；

　　5.实验数据应用SPSS17.0统计软件进行分析.实验数据以均数±标准差（x±S）表示,统计学检验方法为单因素方差分析（one-wayAVONA）,P<0.05差异有统计学意义。

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